Баасы төмөн Флуоресценция жана Брайтфилд микроскоптору: 9 кадам (Сүрөттөр менен)

2024 Автор: John Day | [email protected]. Акыркы өзгөртүү: 2024-01-30 10:40

Fusion 360 долбоорлору »

Флуоресценциялык микроскопия - бул биологиялык жана башка физикалык үлгүлөрдөгү белгилүү структураларды элестетүү үчүн колдонулган сүрөт иштетүүчү ыкма. Үлгүдө кызыккан нерселер (мисалы, нейрондор, кан тамырлар, митохондрия ж. Б.) Флюоресценттик кошулмалар ошол конструкцияларга гана жабышып калгандыктан элестетилет. Эң кооз микроскопиялык сүрөттөрдүн айрымдары флуоресценциялык микроскоптор менен чогултулат; кээ бир мисалдарды көрүү үчүн Nikon MicroscopyU веб -баракчасында көрсөтүлгөн бул сүрөттөрдү текшериңиз. Флуоресценциялык микроскопия белгилүү бир түзүлүшкө же клетканын тибине багытталган көптөгөн биология изилдөөлөрү үчүн пайдалуу. Мисалы, мээдеги нейрондор боюнча көптөгөн изилдөө иштери нейрондорду атайын чагылдырган флуоресценциялык микроскопиялык ыкмаларды колдонууга байланыштуу.

Бул көрсөтмөдө мен флуоресценциялык микроскопиянын негизги принциптерин жана үч түрдүү арзан флуоресценттүү микроскопту кантип курууну карап чыгам. Бул системалар адатта миңдеген долларларга бааланат, бирок аларды жеткиликтүү кылуу үчүн акыркы аракеттер жасалды. Бул жерде мен сунуштаган дизайндар смартфонду, dSLRди жана USB микроскопун колдонот. Бул долбоорлордун баары жаркыраган талаа микроскоптору катары иштейт. Кел, баштайлы!

1 -кадам: Флуоресценциялык микроскопияга сереп

Флуоресценциялык микроскопиянын негизги идеясын түшүнүү үчүн, түн ичинде дарактарга, жаныбарларга, бадалдарга жана токойдо жашагандардын баарына толгон калың токойду элестетиңиз. Эгерде сиз фонарикти токойго чачсаңыз, анда бул түзүлүштөрдүн бардыгын көрөсүз жана белгилүү бир жаныбарды же өсүмдүктү элестетүү кыйын болот. Айталы, сиз токойдо көк карагайдын бадалдарын көрүүгө гана кызыктыңыз. Муну ишке ашыруу үчүн, сиз чымындарды черника бадалына гана тартууга үйрөтөсүз, ошондо сиз токойду караганыңызда черник бадалдары гана жарык берет. Сиз черника бадалдарын от чымындар менен белгилединиз деп айта аласыз, ошондо сиз токойдогу черника структураларын гана элестете аласыз.

Бул аналогдо токой бүтүндөй үлгүнү, көк карагай бадалдары сиз элестетүүнү каалаган структураны билдирет (мисалы, белгилүү бир клетка же клеткалык органелл), ал эми от чымындар флуоресценттик кошулма. Кол чыракты күйгүзбөстөн жалгыз өзүңүз жаркырата турган жагдай жаркыраган талаа микроскопиясына окшош.

Кийинки кадам - флуоресценттик кошулмалардын (флуорофорлор деп да аталат) негизги функциясын түшүнүү. Флуорофорлор - бул үлгүдөгү конкреттүү структураларга бекитүү үчүн иштелип чыккан кичинекей объекттер (нанометрлердин масштабы боюнча). Алар толкун узундугунун тар диапазонунда жарыкты сиңирип, жарыктын башка толкун узундугун кайра чыгарышат. Мисалы, бир фторофор көк жарыкты сиңириши мүмкүн (б.а. фторофор көк жарык менен козголот), анан кайра жашыл жарык чыгарат. Адатта, бул дүүлүгүү жана эмиссия спектри менен жыйынтыкталат (жогорудагы сүрөт). Бул графиктер фторофор соруп алган жарыктын толкун узундугун жана флуорофор чыгарган жарыктын толкун узундугун көрсөтөт.

Микроскоптун дизайны эки негизги айырмасы бар кадимки жаркыраган микроскопко абдан окшош. Биринчиден, үлгүнү жарыктандыруучу жарык флуорофорду козгой турган толкун узундугу болушу керек (жогорудагы мисал үчүн жарык көк болгон). Экинчиден, микроскоптун эмиссиялык жарыгын гана чогултуу керек (жашыл жарык), ал эми көккө бөгөт коюу. Бул көк жарык бардык жакка кетет, бирок жашыл жарык үлгүдөгү конструкциялардан гана келет. Көгүлтүр жарыкты тосуу үчүн микроскопто, адатта, жашыл жарыктын көк жарыксыз өтүүсүнө шарт түзүүчү узун өтмө чыпкасы бар. Ар бир longpass чыпкасы кесүү толкун узундугуна ээ. Эгерде жарык толкун узундугуна караганда узунураак болсо, анда ал чыпкадан өтө алат. Демек, аты "узун". Кыска толкун узундугу бөгөттөлгөн.

Бул жерде флуоресценциялык микроскопиянын бир нече серептери келтирилген:

bitesizebio.com/33529/fluorescence-microsc…

www.microscopyu.com/techniques/fluorescenc…

www.youtube.com/watch?v=PCJ13LjncMc

2 -кадам: Ray Optics менен микроскопторду моделдөө

Оптика сынагында 2 -орун